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  • 间接血凝实验实验报告范文

    一、间接血凝试验结果判定如何

    结果判定:移去玻板,将血凝板放在纸上,先观察阴性对照血清1 : 8孔,稀释液对照孔,均应无凝集或出现“ ”凝集。

    阳性血清对照1 : 2 -1 : 256各孔应出现“ + + -+ + + +”凝集合格。在对照孔合格的前提下,再观察待检血清各孔以呈现“ + + ”凝集的最大稀释倍数为该份血清的抗体效价。

    例如1号待检血清各孔,以呈现“+ + -+ + + +”凝集,第7孔呈现“ + +”凝集,第8孔呈现“ + ”凝集,第9孔无凝集,那么就可以判定该份血清的猪瘟的抗体效价为1 : 128(1 :27)。接种猪瘟疫苗的猪群免疫抗体达到1 : 16 (即第4孔呈现“ + + ”凝集)为免疫合格。

    二、如何进行血凝试验

    多种病毒能凝集动物的红细胞,此种凝集作用可被相应抗血 清抑制。

    因此,可用血凝抑制试验鉴定病毒,并可检测病毒毒价和血清中的抗体效价。血凝试验时可根据病毒血凝特性用适当动物 的红细胞。

    流感病毒用鸡红细胞、乙脑病毒用鹅红细胞、猪细小病 毒用豚鼠或鸡红细胞。(1) 操作方法。

    采集抗凝血液,用生理盐水洗涤离心3次,至 上清液透明无色,取离心沉积红细胞配成1%红细胞悬液。在96 孔微量板上按2倍系列稀释待检病毒液,加样为25 pL,然后每孔 加1%红细胞25 L,摇匀,同时设稀释盐水对照。

    室温经30〜 60 min判定结果。(2) 结果判定。

    凝集程度的判定标准同间接血凝,以出现 50%凝集的最大稀释度为血凝效价。

    三、间接血凝试验操作步骤是什么

    操作步骤:(1)加稀释液:在血凝板上1 -6排的各1 -9孔;第7排的 1 -3孔,第5孔;第8排的1 -12孔各加稀释液50微升。

    (2)稀释待检血清:取1号待检血清50微升加入第1排第1 孔,并将塑嘴插人孔底,右手拇指轻压弹簧2〜3次混匀(避免产 生过多的气泡),从该孔取出50微升移人第2孔,混匀后取出50 微升移人第3孔,直至第9孔混匀后取出50微升丢弃。 此时第 1排1 -9孔待检血清的稀释度(稀释倍数)依次为1 : 2、1 : 4、1 : 8、1 : 16、1 : 32、1 : 64、1 : 128、1 : 256、1 : 512。

    各孔的血 清倍数可表示为1 : 2"。取2号待检血清加入第2排第1孔,同样按上法稀释;取3号 待检血清加入第3排第1孔,直到第6排(注意:每取一份血清时, 必须更换塑嘴1个)。

    (3)稀释阴性对照血清:在血凝板的第7排第1孔加阴性血 清50微升,对倍稀释至第3孔混匀后丢弃50微升。此时阴性血 清的稀释倍数依次为1 : 2、1 :4、1 : 8。

    第5孔为稀释液对照。(4)稀释阳性对照血清:在血凝板的第8排第1孔加阳性血 清50微升,对倍稀释至第12孔,混匀后从该孔取出50微升丢弃。

    此时阴性血清的稀释倍数依次为1 : 2 -1 : 4 096。

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